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優(yōu)化原代細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率的關(guān)鍵試劑與方法
2025-01-22 在生命科學(xué)研究領(lǐng)域，原代細(xì)胞作為接近體內(nèi)生理狀態(tài)的細(xì)胞模型，一直備受關(guān)注。然而，對原代細(xì)胞進(jìn)行有效的基因操作卻面臨諸多挑戰(zhàn)，原代細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑的出現(xiàn)則為解決這一難題提供了關(guān)鍵途徑。原代細(xì)胞直接從生物體組織中分離獲得，保留了細(xì)胞的原始特性和功能，能更準(zhǔn)確地反映細(xì)胞在體內(nèi)的真實(shí)行為。但由于其特殊的生物學(xué)特性，如生長緩慢、對外部刺激敏感等，使得將外源核酸導(dǎo)入原代細(xì)胞變得困難重重。傳統(tǒng)的轉(zhuǎn)染方法在原代細(xì)胞上往往效果不佳，要么轉(zhuǎn)染效率低，無法滿足實(shí)驗(yàn)需求；要么對細(xì)胞毒性大，導(dǎo)致細(xì)胞大量死...
細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中胎牛血清FBS的作用有哪些
2025-01-22 胎牛血清（FetalBovineSerum，簡稱FBS）是一種常用于細(xì)胞培養(yǎng)的血清，胎牛血清富含多種生物活性成分，包括生長因子、激素、營養(yǎng)物質(zhì)等。這些成分對于細(xì)胞生長、分化和代謝具有重要作用。在細(xì)胞培養(yǎng)中，胎牛血清通常被用作培養(yǎng)基的添加劑，以提供細(xì)胞生長所需的營養(yǎng)物質(zhì)和生長因子。為什么選擇牛血清牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中用量最大的天然培養(yǎng)基，含有豐富的細(xì)胞生長必須的營養(yǎng)成份，具有極為重要的功能。牛血清分為小牛血清、新牛血清、胎牛血清。其中胎牛血清是品質(zhì)高的血清，因?yàn)樘ヅ＿€未接觸外界，...
提高轉(zhuǎn)染效率：低毒細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑的優(yōu)化與實(shí)踐
2025-01-21 在細(xì)胞生物學(xué)研究領(lǐng)域，細(xì)胞轉(zhuǎn)染技術(shù)是一項(xiàng)至關(guān)重要的工具，它能夠?qū)⑼庠春怂岱肿訉?dǎo)入細(xì)胞內(nèi)，從而實(shí)現(xiàn)對基因功能的研究、蛋白質(zhì)表達(dá)調(diào)控等眾多關(guān)鍵實(shí)驗(yàn)。而在這其中，低毒細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑正逐漸嶄露頭角，成為科研人員的得力助手。傳統(tǒng)的細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑往往存在細(xì)胞毒性較高的問題，這會對細(xì)胞的正常生理功能產(chǎn)生嚴(yán)重影響。高毒性可能導(dǎo)致細(xì)胞存活率降低，細(xì)胞形態(tài)發(fā)生改變，甚至引發(fā)細(xì)胞凋亡。這不僅干擾了實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，還限制了某些對細(xì)胞狀態(tài)要求苛刻的研究。低毒細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑的出現(xiàn)則有效解決了這些問題。其最大...
慢病毒濃縮液：病毒回收率高達(dá)92%
2025-01-10 慢病毒載體可感染分裂細(xì)胞及非分裂細(xì)胞。其轉(zhuǎn)移基因片段容量較大，目的基因表達(dá)時(shí)間較長，不易引發(fā)宿主免疫反應(yīng)等諸多優(yōu)點(diǎn)；因此，慢病毒己經(jīng)成為表達(dá)外源基因或外源shRNA的常用載體形式之一，并且應(yīng)用越來越廣泛。慢病毒濃縮液介紹EZ慢病毒濃縮液是一種快速濃縮慢病毒的產(chǎn)品，使用未濃縮病毒上清與本產(chǎn)品低溫孵育后低速離心即可獲得濃縮病毒液。不同于傳統(tǒng)的耗時(shí)耗力的超濾、超速離心法，使用本產(chǎn)品操作簡便、快捷、安全，回收率高。慢病毒濃縮液優(yōu)勢?高濃縮比：濃縮體積高達(dá)240倍，如：可將120mL的...
BCA蛋白定量試劑盒有什么作用（附帶產(chǎn)品說明書）
2025-01-10 BCA(Bicinchoninicacid)法是目前應(yīng)用比較廣泛的蛋白質(zhì)濃度測定方法?；陔p縮脲反應(yīng)，即在堿性環(huán)境下蛋白質(zhì)將Cu2+還原成Cu+，Cu+與BCA試劑形成紫顏色的絡(luò)合物，在562nm處有高的吸光值，該反應(yīng)產(chǎn)物的量與蛋白質(zhì)濃度成正比。測定其在562nm處的吸光值，并與標(biāo)準(zhǔn)曲線對比，即可計(jì)算待測蛋白的濃度。該方法快速靈敏、穩(wěn)定可靠且對不同種類蛋白質(zhì)變異系數(shù)很小。試劑盒中提供了濃度穩(wěn)定的蛋白標(biāo)準(zhǔn)品用于制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。BCA蛋白定量試劑盒產(chǎn)品作用準(zhǔn)確靈敏，線性范圍廣：BC...
干貨分享 | 細(xì)胞凍存與復(fù)蘇避坑指南
2025-01-08 細(xì)胞凍存和復(fù)蘇是細(xì)胞培養(yǎng)中的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，直接影響細(xì)胞存活率和活力，關(guān)系到后續(xù)細(xì)胞實(shí)驗(yàn)?zāi)芊癜凑沼?jì)劃有效地進(jìn)行。要想做好細(xì)胞凍存和復(fù)蘇，首先請牢記下面這四個(gè)字：慢凍快融！1、為什么要慢凍快融？凍存細(xì)胞時(shí)，細(xì)胞內(nèi)外環(huán)境中的水會形成冰晶。如果直接將細(xì)胞凍存到-196℃的液氮中，由于凍結(jié)過程中胞外溶液中的水先結(jié)冰，使胞外溶液不斷濃縮，引起細(xì)胞電解質(zhì)升高、滲透壓改變、脫水及蛋白質(zhì)變性等，會導(dǎo)致細(xì)胞受到機(jī)械性損傷。2、細(xì)胞凍存-讓你細(xì)胞安心沉睡3、細(xì)胞復(fù)蘇-讓細(xì)胞滿血復(fù)活■細(xì)胞拿取盡量減少樣...
CFDA, SE 細(xì)胞增殖示蹤熒光探針檢測原理與注意事項(xiàng)
2025-01-08 CFDA-SE可用于細(xì)胞示蹤，也可用于細(xì)胞增殖檢測。經(jīng)CFDA-SE標(biāo)記的細(xì)胞可用于體外和體內(nèi)增殖研究，且具有不會使鄰近細(xì)胞染色的功能。CFDA-SE常用于淋巴細(xì)胞的增殖檢測，也可用于成纖維細(xì)胞，自然殺傷細(xì)胞，造血祖細(xì)胞等其他細(xì)胞的增殖檢測。檢測原理CFDASE可以通過完好的細(xì)胞膜，進(jìn)入細(xì)胞后被細(xì)胞內(nèi)的酯酶催化分解成CFSE。CFSE可以隨機(jī)地、不可逆地和細(xì)胞內(nèi)蛋白的賴氨酸殘基或其它氨基發(fā)生結(jié)合反應(yīng)，并標(biāo)記這些蛋白，CFDA-SE標(biāo)記細(xì)胞呈綠色熒光。CFDA-SE標(biāo)記的分裂細(xì)...
細(xì)胞培養(yǎng)中碰到真菌污染怎么辦（真菌污染如何預(yù)防）
2024-12-26 真菌污染也是細(xì)胞培養(yǎng)過程中最常見的一種污染。真菌污染一般情況下對其周圍局部細(xì)胞影響較大，而其他地方的細(xì)胞則正常生長。另外由于真菌可以通過孢子繁殖，因此一旦污染很容易發(fā)生擴(kuò)散。?真菌污染主要種類：煙曲霉菌、黑曲霉菌、毛霉菌、白色念珠菌和酵母菌污染等（如圖）其特點(diǎn)如下：①一般來說，培養(yǎng)液不會變渾濁；②比較容易發(fā)現(xiàn)，肉眼可見點(diǎn)狀菌落（淡黃色或者白色）漂浮在培養(yǎng)基表面；③普通倒置顯微鏡下觀察，可見絮狀交錯(cuò)的菌絲或菌團(tuán)生長在細(xì)胞之間；有時(shí)真菌并不是直接分布于細(xì)胞貼壁層，需要通過調(diào)整顯微...

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