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細(xì)胞生物學(xué)
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1640培養(yǎng)基最初用于人白血病細(xì)胞的懸浮培養(yǎng)或單層培養(yǎng)。后來(lái)發(fā)現(xiàn)這種培養(yǎng)基也適用于培養(yǎng)HeLa, Jurkat, MCF-7, PC12, 外周血單核細(xì)胞( B 及T 淋巴細(xì)胞),星形細(xì)胞和癌細(xì)胞。RPMI 1640 培養(yǎng)基與其它培養(yǎng)基的區(qū)別是含有還原型谷*(*換成胱)甘肽和高濃度維生素。
DMEM高糖培養(yǎng)基是一種廣泛使用的基礎(chǔ)培養(yǎng)基,適用于多種哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng),包括HeLa, 293, Cos-7, 和 PC-12 等細(xì)胞系,以及原代成纖維細(xì)胞,神經(jīng)元,神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞,人臍帶靜脈內(nèi)皮細(xì)胞,平滑肌細(xì)胞等,DMEM 與 MEM 相比,含有四倍濃度的氨基酸和維生素。
DMEM,即Dulbecco’s Modified Eagle Medium,Dulbecco’s改良培養(yǎng)基,是在MEM培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上改良而來(lái),根據(jù)葡萄糖含量不同分低糖和高糖兩種。DMEM低糖培養(yǎng)基適合代謝作用慢、依賴性貼壁細(xì)胞的培養(yǎng)。含多類細(xì)胞培養(yǎng)所需的氨基酸、維生素、無(wú)機(jī)鹽等成分,不含蛋白質(zhì)或生長(zhǎng)因子,需根據(jù)細(xì)胞種類添加5-10%血清或無(wú)血清添加物使用。
10XPBS(無(wú)菌)即10倍濃縮的磷酸鹽緩沖液,是生物學(xué)、生物化學(xué)研究中使用較廣泛的一種平衡鹽*液。稀釋為1X PBS磷酸鹽緩沖液,可用于組織塊的洗滌、細(xì)胞的漂洗、其他試劑的配制以及作為細(xì)胞計(jì)數(shù)的替代液等。
1XPBS(無(wú)菌)即磷酸鹽緩沖液,是生物學(xué)、生物化學(xué)研究中使用較廣泛的一種平衡鹽*液。常用于組織塊的洗滌、細(xì)胞的漂洗,其他試劑的配制以及作為細(xì)胞計(jì)數(shù)的替代液等。
Collagenase, TypeⅣ 膠原酶Ⅳ型含有低*酶活性,通常用于胰島細(xì)胞的制備,或者需要維持受體完整性的細(xì)胞制備實(shí)驗(yàn)。膠原酶分離效果好,即使有鈣、鎂離子存在仍有活性,故可用PBS和含血清的培養(yǎng)液配制,既操作簡(jiǎn)便又可提高細(xì)胞成活率,終濃度200u/mL,此酶消化作用緩和,無(wú)需機(jī)械振蕩。
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